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生物儀器中酶標儀濾光片的應用介紹: 工作原理+用途

時間:2022-03-16 22:10:04 點擊次數:33
 

    酶標儀(MicroplateReader)是對酶聯免疫檢測(EIA)實驗結果進行讀取和分析的專業儀器。酶聯免疫反應通過偶聯在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進行的,反應結果以顏色顯示,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標本中待測抗體或抗原的濃度。

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    隨著檢測方式的發展,擁有多種檢測模式的單體臺式酶標儀叫做多功能酶標儀,可檢測吸光度(Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學發光(Lum)。


    酶標儀從原理上可以分為光柵型酶標儀和濾光片型酶標儀。光柵型酶標儀可以截取光源波長范圍內的任意波長,而濾光片型酶標儀則根據選配的生化儀干涉濾光片,只能截取特定波長進行檢測。


    酶標儀工作原理:


    酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。光源燈發出的光波經過濾光片之后變成一束單色光,進入塑料微孔極中的待測標本.該單色光一部分被標本吸收,另一部分則透過標本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉換成相應的電信號.電信號經前置放大,對數放大,模數轉換等信號處理后送入微處理器進行數據處理和計算,最后由顯示器和打印機顯示結果。


    酶標儀濾光片的放置:


    在使用濾光片作濾波裝置時與普通比色計一樣,酶標儀濾光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,聚光鏡,光欄后到達反射鏡,經反射鏡作90°反射后垂直通過比色溶液,然后再經濾光片送到光電管.


    酶標儀檢測什么?


    光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關系。檢測單位用OD值表示, OD是optical density(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度


    檢測結果的影響因素:


    由于有相當多的因素會影響檢測的結果,如不同的酶標板,檢測試劑的體積,都會造成OD值的不同,因此,只有使用同一酶標板反應的試劑檢測結果才能比較和分析。


    酶標儀的用途:


    可廣泛應用于低紫外區的DNA、RNA定量及純度分析(A260/A280)和蛋白定量(A280/BCA/Braford/Lowry),酶活、酶動力學檢測,酶聯免疫測定(ELISAs),細胞增殖與毒性分析,細胞凋亡檢測(MTT),報告基因檢測及G蛋白偶聯受體分析(GPCR)等。


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